發(fā)布時間:2021/5/26 8:50:22 閱讀次數(shù):1118
ELISA方法的基本原理是:
①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性.
②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性.在測定時,把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng).用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,蕞后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例.加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析.由于酶的催化頻率很高,故可放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到很高的敏感度.因此,ELISA檢測是一項定位 定性和定量(敏感度可達每毫升ng~pg的水平)的綜合技術(shù).常用的酶是辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AKP)
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